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一、環(huán)境與硬件準備
1. 環(huán)境控制
溫度:20–25℃,波動≤±1℃;濕度:40%–60%,避免結(jié)露。
遠離振動源(如離心機、風機)、強電磁場與直吹氣流,臺面穩(wěn)固防滑,機械泵獨立放置,避免與儀器接觸傳振。
電源:配 UPS 防斷電;主斷路器置On,電子服務(wù)開關(guān)設(shè)Operating ModeThermo Fisher。
2. 氣體與真空
氮氣:純度≥99.999%,壓力 800±30 kPa(8±0.3 bar),每日檢漏,鋼瓶留余壓≥500 kPa。
真空啟動:開機抽真空≥2 小時,UHV 低于 10?? mbar;Bakeout(12 小時)后,F(xiàn)T 分析器穩(wěn)定≥8 小時,真空達 10?1? mbar 級再測試。
頻繁開關(guān)機:短期(1–3 天)保持真空;長期(>1 周)關(guān)機需按規(guī)程放空,保護渦輪泵。
二、開機與校準(數(shù)據(jù)準確核心)
1. 開機流程
上電后啟動系統(tǒng),機械泵→渦輪泵→真空建立;斷電恢復(fù)后若已放空,需重新 Bakeout。
進入On 模式至少 90 分鐘后再校準,避免直接從 Off 模式校準Thermo Fisher。
2. 校準要求
日常:每日做質(zhì)量校準;受控環(huán)境可每周 1 次;確保 24 小時內(nèi)質(zhì)量偏差<3 ppm(外標)、1 ppm(內(nèi)標,鎖質(zhì)量)Thermo Fisher Scientific。
月度:系統(tǒng)校準(含四極桿隔離質(zhì)量與分辨率)Thermo Fisher Scientific。
調(diào)諧合格指標:
正離子:NL>1.0e8、IT<5 ms,特征峰(m/z 195、524、922–1822)清晰。
負離子:NL>1.0e8、IT<5 ms,特征峰(m/z 265、514、1280–1780)清晰Thermo Fisher。
TIC 波動<10%(穩(wěn)定噴霧關(guān)鍵)Thermo Fisher Scientific。
3. 校準操作
正 / 負離子模式分別用對應(yīng)校準液(賽默飛貨號 88323/88324),以 5 μL/min 輸注,確認噴霧穩(wěn)定再執(zhí)行Thermo Fisher。
校準后用Evaluate 功能驗證,不合格需重復(fù)校準Thermo Fisher。
三、樣品與進樣規(guī)范
1. 樣品制備
濃度:單樣品≤10 μg/mL,過高易污染離子源。
溶劑:優(yōu)選色譜級甲醇 / 水;難溶物先用二氯甲烷等溶解,再用甲醇 / 水稀釋;禁用強酸強堿、難揮發(fā)溶劑(如 DMSO、DMF、表面活性劑)。
過濾:配置后經(jīng) 0.22 μm 濾膜過濾,去除不溶物。
體積:樣品瓶體積≥0.5 mL;低于 0.5 mL 需用內(nèi)插管,避免空針。
2. 進樣操作
使用匹配規(guī)格樣品瓶、瓶蓋與預(yù)切割墊,避免損壞進樣針;瓶蓋適度擰緊,過緊易引發(fā)負壓空針。
進樣前檢查管路無氣泡、無漏液,流速與梯度符合方法要求。
四、方法與參數(shù)設(shè)置
1. 基礎(chǔ)參數(shù)
掃描模式:根據(jù)需求選 Full MS、SIM、AIF-MS/MS 等;分辨率設(shè) 35,000 及以上時,正負掃描循環(huán)約 1 秒Thermo Fisher Scientific。
AGC 目標:過高易導(dǎo)致空間電荷 / 聚束效應(yīng),過低則靈敏度下降;參考默認模板,按需微調(diào)Thermo Fisher Scientific。
注射時間(IT):與 AGC 聯(lián)動,避免過長導(dǎo)致污染或信號飽和。
極性切換:支持,切換時間約 250 ms;正負同時掃描時,需匹配循環(huán)時間需求Thermo Fisher Scientific。
2. 離子源設(shè)置(H-ESI 為例)
鞘氣(Sheath Gas):正離子 5–10,負離子 7–12;輔助氣(Aux Gas)正離子 2、負離子適量,以 TIC 穩(wěn)定為準Thermo Fisher Scientific。
噴霧電壓:正離子約 4 kV,噴霧電流~0.9 μA;毛細管溫度 320℃,S-lens RF 水平 50(參考值,按需優(yōu)化)Thermo Fisher。
離子傳輸管(ITT):根據(jù)污染頻率更換,信號下降 / 背景升高 / 源壓異常時及時清潔或更換Thermo Fisher Scientific。
五、日常維護與污染控制
1. 日常清潔
每日:清潔離子源腔體、噴霧針、樣品盤;檢查毛細管入口無堵塞。
每周:清潔樣品瓶架、進樣針;檢查氣路密封。
離子源清潔:取下腔體、加熱模塊、毛細管,用 50% 甲醇水超聲 15 分鐘,晾干后安裝。
2. 定期維護
| 周期 | 維護內(nèi)容 |
|---|---|
| 6–12 個月 | 更換機械泵油(用原裝油,油位在刻度線間;不同品牌油需新油沖洗),清潔泵濾網(wǎng),檢查 密封 |
| 每 2000–300 樣品 / 年度 | 深度清潔離子光學部件(透鏡、多極桿),檢查電子倍增器(增益下降明顯時更換) |
| 年度 | 2 次專業(yè)保養(yǎng)(離子源 / 透鏡 / 傳輸桿清洗、真空系統(tǒng)檢查、液相校準、電氣檢測) |
六、關(guān)機與數(shù)據(jù)管理
1. 關(guān)機規(guī)范
分析結(jié)束:推薦留Standby 模式,不直接關(guān)機,保障下次質(zhì)譜精度Thermo Fisher。
長期關(guān)機:按規(guī)程放空真空,關(guān)閉氮氣與電源,做好儀器防塵保護。
2. 數(shù)據(jù)安全
數(shù)據(jù)存至課題組專屬文件夾,避免覆蓋;U 盤拷貝前先格式化,防止病毒或格式?jīng)_突。
原始文件保留,定期備份,命名規(guī)范(含日期、樣品、批次)。
七、安全與應(yīng)急
高壓風險:操作時禁止觸碰離子源、高壓接口;維護前斷電并釋放靜電。
真空泄漏:若 Tune 顯示壓力異常,立即停機檢漏,嚴禁帶壓操作。
污染應(yīng)急:信號驟降 / 背景升高時,優(yōu)先清潔離子源與 ITT;必要時聯(lián)系賽默飛工程師。


